脊髓灰質(zhì)炎是由脊髓灰質(zhì)炎病毒引起的一種急性傳染病。該疾病主要通過疫苗進行預防，相關疫苗主要有兩種：利用(yòng)野生脊髓灰質(zhì)炎病毒株生産的滅活疫苗（IPV）和利用(yòng)減毒的脊髓灰質(zhì)炎病毒株制備的口服減毒活疫苗（OPV）。IPV的優點是便于保存和運輸，副作(zuò)用(yòng)小(xiǎo)；OPV的優點是接種方便，接種量小(xiǎo)，可(kě)引起機體(tǐ)的繼發性免疫，免疫效果好。

  為(wèi)了全面消滅脊髓灰質(zhì)炎，2013年世界衛生組織（WHO）通過《全球消滅脊髓灰質(zhì)炎最後階段戰略規劃（2013—2018）》，要求使用(yòng)OPV的國(guó)家于2015年10月以後在常規免疫程序中引入至少一劑IPV，并逐步全部替換為(wèi)IPV。2015年1月，原國(guó)家食品藥品監督管理(lǐ)總局批準了具有我國(guó)完全自主知識産權的全球首個Sabin株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗埃必維（Sabin-IPV）的上市申請。該疫苗由中國(guó)醫(yī)學(xué)科(kē)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物(wù)學(xué)研究所（以下簡稱醫(yī)學(xué)生物(wù)學(xué)研究所）研發，打破了當時我國(guó)沒有國(guó)産IPV的現狀，它的上市對我國(guó)徹底消滅脊髓灰質(zhì)炎發揮了至關重要的作(zuò)用(yòng)。醫(yī)學(xué)生物(wù)學(xué)研究所成立于1958年8月，主要任務(wù)是研制、生産脊髓灰質(zhì)炎疫苗，我國(guó)第一粒脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗糖丸（OPV）就誕生于此。然而，使脊髓灰質(zhì)炎糖丸疫苗脫胎換骨成為(wèi)免疫效果更佳、安(ān)全性更高的注射用(yòng)IPV并非一日之功。

數十年技(jì )術沉澱造就埃必維

  早在1983年，醫(yī)學(xué)生物(wù)學(xué)研究所的科(kē)研人員就開始進行脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗的研究。為(wèi)了避免野生病毒株帶來的風險，科(kē)研人員決定采用(yòng)生産減毒活疫苗的Sabin株制備滅活疫苗。然而，由于在制備Sabin株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗時，使用(yòng)的甲醛滅活劑導緻Sabin病毒的保護性抗原不穩定，因此産生的滅活疫苗免疫原性不及野生型脊髓灰質(zhì)炎病毒滅活疫苗。解決上述問題的一個重要方法是增加抗原數量。但是，相對于野生型病毒，Sabin株産量本來就很(hěn)低，如果采用(yòng)傳統的病毒培養方法勢必要擴大生産規模，而生産規模的擴大将大大增加疫苗生産成本，影響IPV的普及。因此，需要優化Sabin株的培養方法以提高病毒的産量，進而獲得足夠的抗原達到有效誘導免疫反應的水平。

  經過20多(duō)年的努力，該研究所于2004年9月提交兩項發明專利申請，分(fēn)别涉及減毒株脊髓灰質(zhì)炎疫苗的培養方法和減毒株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗後處理(lǐ)方法，為(wèi)滅活疫苗的制備奠定了基礎。

  2008年，該研究所開展了Sabin株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗的Ⅰ期臨床試驗，結果顯示，與安(ān)慰劑對比，施用(yòng)高、中、低劑量的人群中沒有出現嚴重副反應；2009—2010年，開展Ⅱ期臨床試驗，結果顯示，與OPV和野生株I PV對比，施用(yòng)高、中、低劑量Sabin株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗的人群中沒有出現嚴重副反應；2012—2014年開展了Ⅲ期臨床試驗，結果顯示，與野生株I PV相比，Sabin株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗的免疫效果相似。

  基于良好的臨床效果，“十二五”期間，醫(yī)學(xué)生物(wù)學(xué)研究所開發的Sabin株滅活疫苗得到了國(guó)家高技(jì )術研究發展計劃和國(guó)家重大新(xīn)藥創制科(kē)技(jì )重大專項的支持，并成功通過審評完成上市，成為(wèi)全球首個獲批的Sabin株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗，為(wèi)我國(guó)IPV接種計劃的順利實施提供了保障。

全面布局方法專利 構建專利叢林

  醫(yī)學(xué)生物(wù)學(xué)研究所圍繞Sabin-IPV的生産工藝提交了一系列發明專利申請，對生産工藝進行全面保護。其中，包括利用(yòng)Vero細胞高密度發酵脊髓灰質(zhì)炎減毒株病毒(Ⅰ、Ⅱ型Sabin株和Ⅲ型Pfizer株)，通過三級放大細胞培養和微載體(tǐ)培養技(jì )術，實現了大規模制備細胞及病毒液的生産技(jì )術；以及利用(yòng)三級濾柱過濾、澄清，超濾濃縮，柱層析純化及滅活等後處理(lǐ)工藝，将病毒液制備成純度高、免疫原性及安(ān)全性好、質(zhì)量穩定的合格疫苗半成品，從而滿足減毒株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗生産需要的純化技(jì )術。這兩項專利申請，為(wèi)毒株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗的制備奠定了重要基礎。醫(yī)學(xué)生物(wù)學(xué)研究所還圍繞利用(yòng)人胚肺二倍體(tǐ)細胞培養脊髓灰質(zhì)炎病毒技(jì )術提交了專利申請，該技(jì )術可(kě)以進一步提高病毒液産量。此外，還提交了聯合疫苗專利申請，涉及Sabin株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗與白喉類毒素、破傷風類毒素、百日咳毒素的聯合疫苗；提交了涉及滅活疫苗有效性評價的專利申請，将豬作(zuò)為(wèi)評價皮内注射脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗有效性的動物(wù)模型，可(kě)研究優化抗原用(yòng)量；提交了涉及滅活疫苗抗原檢測的專利申請，利用(yòng)酶聯免疫吸附實驗測定脊髓灰質(zhì)炎病毒抗原的方法，可(kě)用(yòng)于滅活疫苗生産中抗原的定性和定量檢測。

  由于生産Sabin-IPV的毒株屬于已知毒株，因此從産品方面申請專利保護Sabin株脊髓灰質(zhì)炎滅活疫苗，授權概率較小(xiǎo)。因此，醫(yī)學(xué)生物(wù)學(xué)研究所以Sabin-IPV的制備方法為(wèi)突破點，對Sabin株病毒的培養方法、純化和滅活方法、安(ān)全性和免疫原性評價方法、抗原檢測方法等技(jì )術進行了全方位專利布局。雖然不能(néng)直接保護疫苗産品，但可(kě)以從一定程度上提高競争産品的進入門檻。

找準技(jì )術改進方向 助力産品升級

  對相關專利進行梳理(lǐ)可(kě)以發現，醫(yī)學(xué)生物(wù)學(xué)研究所已經找準了技(jì )術改進方向，也明确了IPV疫苗生産中亟待解決的技(jì )術問題，即如何提高抗原量以達到有效誘導免疫反應的水平。

  該研究所提出利用(yòng)微載體(tǐ)發酵方法培養Ver o細胞，并将收獲的細胞用(yòng)于培養脊髓灰質(zhì)炎減毒株病毒（Sabin株），通過對培養步驟、培養條件、接種比例等具體(tǐ)參數進行優化，提高病毒産量，滿足了後續制備疫苗的抗原需求，促進了國(guó)産IPV的研發。埃必維的上市改寫了我國(guó)不能(néng)生産IPV的曆史。

  對于疫苗産品來說，如果其使用(yòng)的抗原成分(fēn)是已公開的，可(kě)以嘗試從制備方法，如病原體(tǐ)的培養、純化、滅活、檢測等方面進行專利布局。另外，還可(kě)以嘗試從改變疫苗産品的輔料、佐劑等方面入手，通過改進疫苗的組成來對疫苗産品進行更直接的保護。

  醫(yī)學(xué)生物(wù)學(xué)研究所對Sabin株滅活疫苗的開發，适應了國(guó)家IPV的戰略需求，研發過程獲得一系列政策支持，産品上市進程加快。另外，對于疫苗生産技(jì )術，該研究所盡早布局、未雨綢缪，在臨床試驗之前就進行了專利布局，形成了一套擁有自主知識産權的制備方法。對研發主體(tǐ)來說，根據自身特點對已知方法進行改進，從而提高産品的生産效率或者降低生産成本等，也是一種行之有效的研發思路。（作(zuò)者單位：國(guó)家知識産權局專利局專利審查協作(zuò)北京中心）